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活菌計(jì)數(shù)效率瓶頸如何破?博大博聚微生物細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的實(shí)踐方案
發(fā)布時(shí)間:2025.09.02 瀏覽數(shù):132
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在微生物研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品衛(wèi)生檢測(cè)等領(lǐng)域,活菌計(jì)數(shù)是銜接實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) - 結(jié)果驗(yàn)證的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——監(jiān)測(cè)菌株傳代中的活性穩(wěn)定性、評(píng)估抑菌藥物的半數(shù)抑制濃度(IC50)、驗(yàn)證食品加工后微生物殘留量,都需要以精準(zhǔn)的活菌濃度、活率數(shù)據(jù)為依據(jù)。但長(zhǎng)期以來,傳統(tǒng)活菌計(jì)數(shù)方法的固有局限,不僅制約了工作效率,還無法解決數(shù)據(jù)可靠性這一痛點(diǎn)。

 

傳統(tǒng)手動(dòng)菌落計(jì)數(shù)法的流程鏈條長(zhǎng):需先對(duì)細(xì)菌懸液進(jìn)行梯度稀釋,再均勻鋪于固體培養(yǎng)基,之后還要經(jīng)歷過夜甚至數(shù)天的恒溫培養(yǎng)。不僅占用大量時(shí)間,后續(xù)計(jì)數(shù)時(shí)還可能因菌落重疊、邊緣模糊,或培養(yǎng)箱內(nèi)溫度 / 濕度不均導(dǎo)致菌落生長(zhǎng)差異,最終引入 ±10%-15% 的計(jì)數(shù)誤差;而常用的OD值檢測(cè)法,本質(zhì)是通過吸光度-濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線間接估算,既無法區(qū)分活菌與死菌(死菌細(xì)胞壁碎片同樣會(huì)產(chǎn)生吸光度),還會(huì)因菌株形態(tài)差異、懸液均一性不足導(dǎo)致數(shù)據(jù)波動(dòng),難以滿足高精度實(shí)驗(yàn)或檢測(cè)需求。

 

針對(duì)這些實(shí)際需求,博大博聚微生物細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過顯微成像技術(shù),提供了一套更適配、更高效的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景的解決方案。該儀器搭載20X光學(xué)成像系統(tǒng)、1000 萬(wàn)高分辨率 CMOS 與雙色熒光通道,配合微生物特異性熒光染料(活菌被染為綠色,死菌被染為紅色),可清晰捕獲單個(gè)細(xì)菌的熒光信號(hào),避免傳統(tǒng)方法中群體估算的局限性。

 

從操作流程來看,該儀器的核心優(yōu)勢(shì)在于簡(jiǎn)化預(yù)處理與標(biāo)準(zhǔn)化操作:無需對(duì)細(xì)菌懸液進(jìn)行離心富集或沉降處理,僅需兩步即可完成樣品準(zhǔn)備——先取 5μL 細(xì)菌懸液與 5μL 微生物雙色熒光染液 1:1 混勻;再吸取 5μL 染色后的混合液,滴加至配套的細(xì)菌計(jì)數(shù)板(計(jì)數(shù)室高度為 5μm),再將細(xì)菌計(jì)數(shù)板置于儀器載物臺(tái)。后續(xù)僅需在軟件中錄入樣品編號(hào)等基礎(chǔ)信息,點(diǎn)擊開始分析,儀器便會(huì)自動(dòng)完成圖像采集、細(xì)菌識(shí)別與數(shù)據(jù)計(jì)算,整個(gè)過程無需鋪板、無需等待培養(yǎng),幾分鐘內(nèi)即可輸出高清熒光圖像及活菌濃度、活率、細(xì)菌直徑分布等參數(shù),大幅縮短了從樣品處理數(shù)據(jù)輸出的周期。

 

在數(shù)據(jù)可靠性方面,該儀器的設(shè)計(jì)邏輯圍繞直接計(jì)數(shù)-精準(zhǔn)識(shí)別展開:不同于傳統(tǒng)方法的間接推導(dǎo),其通過雙色熒光通道區(qū)分活菌與死菌信號(hào),再利用智能算法對(duì)每個(gè)熒光標(biāo)記的活菌進(jìn)行逐一識(shí)別(可自動(dòng)排除雜質(zhì)顆粒干擾),最終可自動(dòng)補(bǔ)償 1:1 染色的稀釋倍數(shù),直接輸出原始細(xì)菌懸液的活菌濃度(單位:viable cells/mL),無需人工換算。其計(jì)數(shù)結(jié)果的重復(fù)性與穩(wěn)定性均優(yōu)于傳統(tǒng)方法,能滿足科研論文數(shù)據(jù)溯源、藥品研發(fā)中 GMP 合規(guī)檢測(cè)等對(duì)數(shù)據(jù)精度的嚴(yán)格要求。

 

儀器實(shí)拍案例圖

面對(duì)活菌計(jì)數(shù)的效率與精度難題,博大博聚微生物細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可切實(shí)化解痛點(diǎn)。其簡(jiǎn)化流程、精準(zhǔn)計(jì)數(shù)的特性,適配科研、藥企、檢測(cè)等多場(chǎng)景需求。若想了解菌株適配方案或流程銜接細(xì)節(jié),可進(jìn)一步咨詢,為實(shí)驗(yàn)與檢測(cè)提效賦能。


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